Người Nhện - Spider-Man xoay quanh câu chuyện về cậu bé Peter Parker vô cùng nhút nhát, đã được cô chú nuôi dưỡng từ nhỏ đến lơn. Một hôm, cậu cùng với lớp đi thăm quan khu nghiên cứu về loài nhện, sau đó Peter đã bị một con nhện cắn và khiến cậu hôn mê bất tỉnh. Khi tỉnh dậy, cậu bỗng nhiên có được một sức mạnh kỳ lạ, đầy phi thường. Peter đã sử dụng sức mạnh đó để làm việc thiện giúp đỡ những người gặp khó khăn và giữ kín bí mật về thân phận của mình. Tuy nhiên, cậu phải sắp đối mặt với một kẻ thù Norman Osborn có sức mạnh lợi hại.